Дослідженню на чутливість до антибіотиків підлягають чисті культури мікроорганізмів або ізольовані колонії із щільних поживних середовищ первинного посіву клінічного матеріалу. Визначення чутливості з використанням клінічного матеріалу (без виділення чистої культури) можливо тільки у виключних випадках за умови підтвердження однорідності культури і високого ступеня обсіменіння при мікроскопії мазків забарвлених за Грамом. При такій ситуації дослідження слід повторити після виділення чистої культури мікроорганізму.Сучасні стандартизовані методи визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків поділяють на дифузійні методи і методи серійних розведень. Дифузійні методи визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків ґрунтуються на здатності АБ дифундувати з просочених ними паперових дисків або пластин в поживне середовище, пригнічуючи ріст мікроорганізмів, посіяних на поверхні агару.